Cy3-TCO，Cy3反式環辛烯的概述
2026-04-13
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Cy3-TCO 是一種結合了 Cy3 熒光染料 和 反式環辛烯（TCO） 的熒光標記探針，廣泛應用于生物成像、蛋白質互作研究及藥物遞送追蹤等領域。以下是對其核心特性和應用的詳細介紹：
一、核心特性
熒光性能
激發波長：550-555 nm
發射波長：568-570 nm
熒光顏色：明亮橙紅色，光穩定性優異，適合長時間曝光實驗（如超分辨顯微鏡）。
光譜優勢：與綠色（如 FITC）、遠紅色（如 Cy5）染料光譜重疊小，便于多色成像中精準區分靶點。
TCO 基團
反應類型：作為親二烯體，可與四嗪（Tetrazine）通過逆電子需求狄爾斯-阿爾德反應（iEDDA）快速結合。
反應速率：極快，通常在幾分鐘內完成。
反應條件：無需金屬催化劑（如銅），避免金屬離子對生物活性的干擾，兼容活細胞及活體成像。
溶解性與穩定性
溶解性：易溶于 DMSO、DMF 等有機溶劑，部分條件下可溶于水。
穩定性：在 -20℃ 干燥避光條件下可長期保存，但需避免反復凍融導致降解。
結構式：
二、應用領域
活細胞與活體成像
優勢：無銅點擊反應特性避免了銅催化劑的毒性，是活體系統（如小鼠模型）和活細胞動態實時標記的理想選擇。
應用場景：細胞表面受體標記、蛋白質定位與追蹤、免疫熒光染色等。
多色熒光成像
優勢：Cy3 的橙色熒光與綠色（如 FITC）和遠紅色（如 Cy5）染料光譜重疊小，可同時用于標記多個靶點，進行共定位研究或多參數檢測。
應用場景：流式細胞術、熒光原位雜交（FISH）等。
預靶向成像
原理：在藥物遞送和診療學中，可先將帶有四嗪的抗體注射到體內靶向腫瘤，后再注射 Cy3-TCO 進行快速“點擊"連接和成像。
優勢：顯著提高信噪比，降低背景干擾。
蛋白質與核酸標記
方法：通過 TCO-四嗪反應，可將 Cy3 高效地連接到預先用四嗪修飾的抗體、蛋白質或核酸分子上。
應用場景：Western Blot、流式細胞術、熒光原位雜交（FISH）等。
三、操作規范
儲存條件
溫度：-20℃ 干燥避光保存。
包裝：避免反復凍融，建議分裝后保存。
取用規范
現配現用：將包裝從冰箱中取出，置于干燥器中緩慢升至室溫，打開瓶蓋取用。
惰性氣體保護：取用后充入氮氣等惰性氣體，封口膜封口，擰緊瓶蓋裝入自封袋，及時放回冰箱。
實驗防護
個人防護：操作時穿戴一次性實驗服及手套，避免直接接觸試劑。
避光處理：孵育及檢測過程中全程避光，防止熒光信號衰減。
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