雌二醇-雞卵清白蛋白偶聯物在免疫分析檢測中有哪些應用?
2024-09-11
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雌二醇-雞卵清白蛋白偶聯物|Estradiol-Ovalbumin Conjugate(Estradiol-OVA Conjugate)
雌二醇 - 雞卵清白蛋白偶聯物在免疫分析檢測中有以下重要應用:
一、酶聯免疫吸附測定(ELISA)
競爭法 ELISA:將偶聯物包被在酶標板上,加入待測樣品和一定量的抗雌二醇抗體。樣品中的雌二醇與偶聯物競爭結合抗體。經過孵育和洗滌后,加入酶標記的二抗,通過酶催化底物顯色。根據顯色強度與標準曲線對比,可以確定樣品中雌二醇的含量。這種方法適用于檢測低濃度的雌二醇。
間接法 ELISA:先將偶聯物包被在酶標板上,加入待測樣品,若樣品中含有雌二醇抗體,會與偶聯物結合。洗滌后加入酶標記的抗抗體,再次孵育和洗滌后,加入底物顯色。顯色強度反映了樣品中雌二醇抗體的水平,間接推斷出雌二醇的存在情況。
二、免疫層析法
膠體金免疫層析:將抗雌二醇抗體標記在膠體金顆粒上,偶聯物固定在硝酸纖維素膜的檢測線上。當含有雌二醇的樣品滴加到試紙條上時,樣品在毛細作用下向前移動。如果樣品中存在雌二醇,會與膠體金標記的抗體結合,形成復合物。該復合物繼續移動,與檢測線上的偶聯物競爭結合抗體。根據檢測線的顯色情況,可以快速判斷樣品中雌二醇的有無或含量范圍。
熒光免疫層析:采用熒光標記的抗體和偶聯物進行檢測。樣品中的雌二醇與熒光標記的抗體結合后,在層析過程中與檢測線上的偶聯物相互作用。通過檢測熒光強度,可以定量分析樣品中雌二醇的含量。這種方法具有更高的靈敏度和準確性。
三、化學發光免疫分析
以偶聯物作為標準品或校準品:在化學發光免疫分析系統中,使用雌二醇 - 雞卵清白蛋白偶聯物制備標準曲線。將已知濃度的偶聯物與抗雌二醇抗體和發光標記物反應,通過測量發光強度與偶聯物濃度的關系,建立標準曲線。然后將待測樣品與抗體和發光標記物反應,根據發光強度在標準曲線上確定雌二醇的含量。
四、免疫傳感器
基于抗體的免疫傳感器:將抗雌二醇抗體固定在傳感器表面,當含有雌二醇的樣品流過傳感器時,雌二醇與抗體結合。然后加入偶聯物作為競爭試劑,與樣品中的雌二醇競爭結合抗體。通過測量傳感器的信號變化,可以定量檢測雌二醇的含量。這種免疫傳感器具有快速、靈敏、實時檢測的優點。
基于適體的免疫傳感器:適體是一種具有高親和力和特異性的核酸或肽分子,可以替代抗體用于免疫傳感器。將適體固定在傳感器表面,與雌二醇結合后,加入偶聯物進行競爭反應。通過檢測傳感器的信號變化,可以實現對雌二醇的檢測。適體免疫傳感器具有穩定性好、易于合成和修飾等優點。
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