鏈霉親和素修飾的藍色染色微球200nm的相關描述
2025-12-28
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鏈霉親和素修飾的藍色染色微球(200nm)是一種結合了鏈霉親和素高親和力與藍色熒光特性的功能化納米材料。
一、特性
粒徑與分散性:粒徑為200納米,這一尺寸使其具有較大的比表面積,有利于高效結合更多的鏈霉親和素分子,同時在溶液中能保持良好的分散性和懸浮性能,適合在復雜生物體系中使用。
材質與穩定性:通常以聚苯乙烯等高分子材料作為微球的基質,具有優異的化學穩定性和生物相容性,且易于表面修飾和功能化。
熒光特性:內部摻入藍色熒光染料,可在特定波長光激發下發出藍色熒光,便于通過熒光顯微鏡、流式細胞儀等設備檢測和分析。熒光信號穩定,不易受外界環境影響。
表面修飾:微球表面修飾有鏈霉親和素,鏈霉親和素是一種具有四個結合位點的四聚體蛋白,能以較高的親和力與生物素分子特異性結合,這種特性使得微球能夠特異性地識別和結合生物素化的目標分子。
二、制備方法
微球制備:通常先制備出200nm左右的聚苯乙烯微球,通過乳液聚合、懸浮聚合等方法可以較為精確地控制微球的粒徑。
熒光染料摻入:在微球制備過程中或后處理階段摻入藍色熒光染料,使微球具備熒光特性。例如,在聚合反應中加入熒光單體,或通過溶脹法將染料包裹入微球內部。
鏈霉親和素偶聯:利用化學偶聯等方法將鏈霉親和素連接到聚苯乙烯微球表面。例如,使用EDC/NHS活化羧基,使鏈霉親和素與微球表面羧基形成共價鍵;或先將生物素共價連接到微球表面,再通過鏈霉親和素與生物素的特異性結合實現修飾。
三、應用領域
免疫分析:在免疫分析中,鏈霉親和素修飾的藍色染色微球可作為標記物來檢測樣本中特定生物分子的存在和濃度。通過與生物素標記的抗體結合,微球能特異性捕獲目標抗原,配合流式細胞術或熒光檢測實現高效檢測。
核酸檢測:可結合生物素化的寡核苷酸探針,用于雜交捕獲、檢測病原體或基因表達水平,在分子生物學研究中發揮重要作用。
細胞分析:用于標記細胞表面的特定抗原,通過熒光顯微鏡或流式細胞儀等設備對標記的細胞進行觀察、分析和分選。
生物分子純化與富集:將鏈霉親和素固定在基質上,與生物素標記的目標生物分子結合,實現特異性分離和純化。修飾熒光微球后,可通過熒光信號實時監測分離進程和效率。
四、使用注意事項
儲存條件:密封后于2-8℃避光保存,避免凍存導致微球團聚或活性喪失。
緩沖液選擇:使用pH 7.2-7.4的緩沖液(如PBS),維持鏈霉親和素活性。
洗滌步驟:用含0.05% Tween-20的緩沖液洗滌3次,去除未結合的鏈霉親和素或生物素化分子。
操作規范:僅供科研使用,不可用于人體實驗或食品接觸。操作時佩戴手套,避免吸入微球粉末;取用前充分混勻,防止濃度變化。
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